GBZ_T 160.81-2004 工作场所空气有毒物质测定 生物类化合物

C 52 GBZ 中华人民共和国国家职业卫生标准 GBZ/T 160.81 －2004 ———————————————————————— 工作场所空气中 生物类化合物的测定方法 Methods for d etermination of biological compounds in the air of workplace 2004 年 5月 21 日发布 2004 年 12 月 1日实施 ———————————————————————— 中华人民共和国卫生部 发布 GBZ/T 160.81 －2004 前 言 为贯彻执行《工业企业设计卫生标准》 （GBZ 1 ）和《工作场所有害因素职业接触限值》（ GBZ 2 ）， 特制定本标准。本标准是为工作场所有害因素职业接触限值配套的监测方法 ，用于监测工作场所空 气中生物类化合物 [ 包括 洗衣粉酶等 ] 的浓度。 本标准从 2004 年12 月1 日起实施。 本标准由全国职业卫生标准委员会提出。 本标准由中华人民共和国卫生部批准。 本标准起草单位：上海医科大学公共卫生学院。 本标准主要起草人：梁友信等。 GBZ/T 160.81 － 2004 工作场所空气中 生物类化合物的测定方法 1 范围 本标准规定了监测工作场所空气中生物类化合物浓度的方法 。 本标准适用于工作场所空气中生物类化合物 浓度的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中 的条款，通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后 所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议 的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GBZ 159 工作场所空气中有害物质监测的采样规范 3 含酶洗衣粉中酶的抗体结合 — 比色法 3.1 原理 空气中 含酶洗衣粉粉尘中的酶用玻璃纤维滤纸采集，洗脱后，与包被在酶标板上的特异性抗体 （ Ab1 ）结合，然后加入特异性抗体（ Ab2 ），最后与一连有标记物的 抗体（Ab3 ）结合，再与显色 剂反应生成有色化合物，比色定量。 3.2 仪器 3.2.1 玻璃纤维滤纸。 3.2.2 采样夹，滤料直径 40mm 。 3.2.3 小型塑料采样夹，滤料直径 25mm 。 3.2.4 空气采样器，流量 0 ～ 10L/min 。 3.2.5 烧杯， 50ml 。 3.2.6 酶标板和酶标板盖。 3.2.7 多孔道微量加样器。 3.2.8 可调微量加样器。 3.2.9 恒温箱。 3.2.10 离心管， 25ml 。 3.2.11 具塞试管， 10ml 。 3.2.12 酶标仪。 3.3 试剂 实验用水为去离子水。所有试剂于冰箱保存。 3.3.1 抗体包被缓冲液， pH ＝9.6 ±0.2 ：称取 1.51g 碳酸钠和 2.93g 碳酸氢钠，溶于 1000ml 水中。可 保存 2 个月。 3.3.2 洗板液：称取 29 .22g 氯化钠、 1.86g Tris 和1.0g 牛血清白蛋白 (BSA) ，溶于 1000ml 水中，用盐 酸溶液 ( 6mol/L ) 调 pH 至8.0 ，加入 0.5ml 吐温20 ，混匀，可保存 1 周。 3.3.3 柠檬酸 - 磷酸缓冲液， pH ＝5.0 ±0.2 ：称取 7.30g 柠檬酸和 23.87g 磷酸氢二钠 (Na 2HPO 4·12H 2O) 溶于 1000ml 水中，可保存 1 个月。 5.4 BSA 封闭液： 2.0g BSA 溶于100ml 洗板液中。 3.3.5 样品萃取液：称取 29. 22g 氯化钠、 0.93g Tris 、4.96g 硫代硫酸钠 (Na 2S2SO 3·5H 2O) 和0.147g 氯 化钙 (CaCl 2·2H 2O) ，溶于约 800ml 水中，加入 1.0g BSA ，溶解后，用盐酸溶液 ( 6mol/L ) 调 pH 至8.0 ， 转移到 1000ml 容量瓶中，定容后加入 1.0ml 吐温20 ，混匀，可保存 1 周。 3.3.6 邻苯二胺（ OPD ）溶液， pH ＝5.0 ：称取 8.0mg OPD ，置于50ml 棕色瓶中，加入 15ml 柠檬酸 - 磷酸缓冲液 ，溶解后，加入 5 µ l 过氧化氢 (30 ％) ，混匀。临用前配制。若溶液变黄，应重新配制。 3.3.7 兔抗体包被溶液：用 10ml 抗体包被缓冲液稀释 10 µl 兔抗血清，混匀。 3.3.8 豚鼠抗体：用 10ml 洗板液稀释 10 µl 豚鼠抗体，混匀。 3.3.9 标有过氧化物酶的兔抗豚鼠抗体：用 10ml 洗板液稀释 10 µl 标有过氧化物酶的兔抗豚鼠抗体， 混匀。 3.3.10 硫酸溶液， 1mol/L ：将55.5ml 硫酸( ρ 20＝ 1.84g/ml ) 慢慢加入 900ml 水中，混匀。 3.4 样品的采集、运输和保存 现场采样按照 GBZ 159 执行。 3.4.1 短时间采样：在采样点，用装好玻璃纤维滤纸的采样夹，以 5L/min 流量采集 15min 空气样品。 3.4.2 长时间采样：在采样点，将装好玻璃纤维滤纸的小型塑料采样夹，以 1L/min 流量采集 2 ～ 8h 空气样品。 3.4.3 个体采样：在采样点，将装好玻璃纤维滤纸的小型塑料采样夹佩戴在采样对象的前胸上部，以 1L/min 流量采集 2 ～ 8h 空气样品。 采样后，将玻璃纤维滤纸的接尘面朝里对折 2 次，放入清洁的塑料袋或纸袋中运输和保存。 3.5 分析步骤 3.5.1